發酵消泡劑制備固化定酶

瀏覽次數：6發布日期：2013-01-22

1、完整細胞的固定化固定化微生物細胞，是利用酶或酶系的一條捷徑，免去了破碎細胞提取酶的手續，酶在細胞內環境中的穩定性高，完整細胞固定化后，酶活損失少。利用復合酶系時，固定化細胞有可能將微生物發酵消泡劑的發酵改為連續酶反應。當然要求底物和產物容易透過細胞膜，而細胞內不應存在產物的分解系統和其它副反應。如果存在副反應，可以采取措施（如加入去污物、熱處理或pH處理等）消除。常用方法有下列幾種：（1）包埋法：類似固定化酶。（2）熱處理：菌體本身可以說是天然的固定化酶。恰當選擇條件與發酵消泡劑，可以通過熱處理使其它酶失活而保存所需酶的活性。例如，可用此法將脂肪酸、葡萄糖異構酶固定在菌體內。（3）吸附法：吸附在吸附劑上。（4）共價法：例如，利用微球菌的細胞壁上可能存在氨基，以碳二亞胺脫水與CM-纖維素連接。這樣的固定化細胞雖無生存能力，但仍保持組氨酸一氨裂合酶活性，并用于發酵消泡劑連續反應。（5）交聯法：有少量嘗試。例如，含有天門冬氨酸酶的大腸桿菌曾用多種雙功能試劑及發酵消泡劑交聯，發現只有戊二醛能使菌體交聯獲得有活力的制劑。但這類方法所得固定化細胞的顆粒仍屬太細，機械性能差。2、固定化方法和載體的選擇一種酶可以用不同方法固定化，所得的固定化酶或是性質雷同或是相差甚遠。同一種方法也往往可適用幾種酶的固定化。將酶或維生素固定化后，往往較原來酶的活性降低，原因有四：（1）進行固定化時，可能與活性中心的氨基殘基的一部分作用受到破壞或結合有關。（2）三維結構發生變化。（3）基質或反應生成物的擴散或膜透性有變。（4）由于發酵消泡劑載體之立體障礙，妨礙基質接近而降低活性；另一方面，酶固定化后，有時發現對熱、有機溶劑、發酵消泡劑、酸、堿、蛋白質變性劑、酶阻抑劑、蛋白分解酶等的抗性增強，使酶反應最適溫度上升，促使反應速度、穩定性和持久性得到改良。相同的酶，若固定化方法不同，它的穩定性可能不同。酶固定化后，隨著酶蛋白的電子結構狀態發生變化，發酵消泡劑載體表面的電荷亦受影響，有時使酶反應的最適pH值亦發生變化。固定化菌體時，因基質或反應生成物的擴散，較活體易受pH值變動的影響，其最適pH或活性曲線會發生變化。如果利用得當，即有可能改孌酶的最適pH值。固定化后，動力學亦常起變化，通常由于基質及生成物的愿體內擴散抵抗影響，其米氏常數(K)往往變大，但對具有與發酵消泡劑載體的電荷相反電荷的基質，因互相牽引，有時米氏常數K值反而變小。發酵消泡劑是專門用在發酵行業的消泡劑，煙臺恒鑫化工消泡劑廠家是一家專業發酵消泡劑生產廠家，十年品質保證，是發酵行業專用的發酵用消泡劑，點擊了解更多知識。本文參考《發酵微生物學》一書。